颗粒细胞抑制素B的表达及其在女性生殖中的意义

颗粒细胞抑制素B的表达及其在女性生殖中的意义

目的探讨抑制素B(INH-B)在颗粒细胞的表达与卵巢反应、卵子成熟及胚胎发育之间的关系。方法收集39名实施体外受精-胚胎移植(IVF-ET)者的颗粒细胞,通过免疫组化技术测定颗粒细胞INH-B表达强度。按照获卵数将患者分为三组,A组:获卵≤5枚;B组:获卵61~5枚;C组:获卵≥16枚。分析比较各组INH-B表达强度、胚胎实验室数据及临床结局。结果①A组的INH-B表达强度显著低于其他二组(P0.001),B组与C组间INH-B 表达强度无显著差异(P0.05)。②颗粒细胞INH-B表达强度与获卵数、受精卵数、卵裂数及可用胚胎数呈正相关(均P0.001)。③颗粒细胞 INH-B表达强度与IVF-ET临床妊娠率无显著相关(P0.05)。结论颗粒细胞INH-B表达可反映细胞自身的功能状态,颗粒细胞功能减退是卵巢反应减低、发育卵泡数目减少的主要原因之一。

卵巢的生理功能

1、FSH：是刺激卵泡发育最首要的激素。

①促使窦前卵泡及窦状卵泡颗粒细胞增殖与分化，缝隙连接形成、分泌卵泡液，使卵泡生长发育。

②前一周期晚黄体期及早卵泡期FSH的上升，促使卵巢内窦状卵泡群的募集。

③激活颗粒细胞芳香化酶，促使E2的合成与分泌。

④促使颗粒细胞合成分泌IGF及其受体，抑制素A、激活素等自分泌、旁分泌物质。

⑤晚卵泡期与E2协同，诱导颗粒细胞生成LH受体，为排卵及黄素化做准备。

2、LH：卵泡期血LH的作用是通过激活P45017α酶活性医学教|育网搜集整理，为E2的合成提供底物—雄烯二酮。

排卵前血LH峰能促使卵母细胞最终成熟及排卵，LH峰值及持续时间同样重要。黄体期低水平LH能增加LDL受体及黄体细胞对LDL的摄取，促使P、抑制素A及E2的合成分泌。支持黄体功能。

抑制素B的临床意义

1.评价睾丸生精功能：比促卵泡刺激素(FSH)能更准确的反映睾丸的生精功能及其损伤程度;两者结合比任一单独使用有较高的诊断敏感性与特异性;

2.区分梗阻性与非梗阻性无精子症患者;

3.预测睾丸精子抽吸结局。

促卵泡生成激素的作用

促卵泡生成激素的作用和性别相关。对于女性，促卵泡生成激素的功能是促进卵泡发育和成熟，及协同促黄体生成素(LH)促使发育成熟的卵泡分泌雌激素和排卵，参与正常月经的形成。对于男性，促卵泡生成激素的作用是促进睾丸曲细精管的成熟和精子的生成。促卵泡生成激素的作用体现在：

1、直接刺激颗粒细胞的增生和分化。

2、诱导颗粒细胞FSH和LH受体合成，提高颗粒细胞对LH的反应性，以保持排前卵泡的肋骨陈的合成和排卵后黄体的形成。

3、FSH可与颗粒细胞表面的受体结合，激活翔安酸环化酶和cAMP-依赖性蛋白激酶以诱导基因产物的表达，如芳香化酶活性增加，使更多的雄激素转化为雌激素。

4、FSH还能积极抑制素，激活素和胰岛素样生长因子-1等的合成，这些多肽类物质在调解优势卵泡和闭锁方面起重要作用。

白细胞的八种类型

白细胞亦称白血球，它的功能是使机体免受病原体(细菌和病毒)、癌细胞、异物侵入，是人体的守卫者。白细胞来源于骨髓中的造血干细胞，在骨髓中发育后进入血液和淋巴液循环，也存在于血管和淋巴管外的组织中。

巨噬细胞

巨噬细胞是个头最大的白细胞。

巨噬细胞由单核细胞分化发育而来，单核细胞几乎存在于所有组织中。巨噬细胞对细胞残体和病原体进行吞噬和消化，这一过程称为吞噬作用。巨噬细胞内的溶酶体会释放溶菌酶破坏病原体。吞噬细胞还是参与适应性免疫的专职抗原提呈细胞。除了免疫功能外，吞噬细胞还扮演者促进生殖细胞发育、性激素、骨组织的再吸收以及血络的形成。

树突状细胞

类似于吞噬细胞，树突状细胞也是一种单核细胞。树突状细胞成熟时会伸出许多树突样或伪足样突起，与神经元的树突相似。树突状细胞通常存在于跟外界接触的皮膜(黏膜)部位，比如皮肤、内层的鼻子、肺、胃与肠的内层。树突状细胞通过摄取、加工处理和递呈抗原到淋巴结和淋巴器官中的淋巴细胞帮助机体识别病原体，启动特异性免疫应答。

B淋巴细胞

B细胞是淋巴细胞的成分之一。B细胞受抗原刺激后，会增合成和分泌一种特殊的蛋白质——抗体对抗病原体，抗体与抗原结合帮助机体识别病原体，并使之成为靶细胞被其他免疫细胞清除。被称为记忆细胞的B细胞可以保持对病原菌生物分子标记物的记忆，使得同一种抗原再次进入机体时免受感染。

这使得机体保持针对特定病原体的长期免疫力。

T淋巴细胞

类似于B细胞，T细胞也是淋巴细胞之一。T淋巴细胞来源于骨髓，迁移到胸腺内分化成熟。T细胞通过直接杀伤靶细胞和释放淋巴因子参与免疫反应。T细胞包括细胞毒性T细胞、辅助性T细胞、抑制性T细胞、自然杀伤T细胞和记忆T细胞。细胞毒性T细胞直接杀伤靶细胞，辅助性T细胞协助B细胞产生抗体，抑制性T细胞抑制B细胞和其他T细胞对抗原的免疫应答。

NKT细胞具有T细胞和NK细胞细胞两重性质，但是NKT细胞不是NK细胞而是T细胞。

自然杀伤细胞

自然杀伤细胞是分布于血液循环的淋巴细胞，它能识别被感染细胞和衰老细胞。NK细胞含有化学颗粒，NK细胞能够识别肿瘤或病毒感染的细胞，通过释放化学颗粒吞噬破坏病变细胞。这些化学颗粒能溶解病变细胞的细胞膜，促使细胞凋亡,最终杀伤靶细胞。

同时应该区分NK细胞和某些T细胞，比如NKT细胞，不要相互混淆。

嗜中性粒细胞

嗜中性粒细胞属于有粒白细胞，具有吞噬作用，吞噬过程中释放化学颗粒破坏病原体。细胞核呈分叶状。嗜中性粒细胞是血液循环中数量最多的粒细胞，机体遭遇病原体入侵时能迅速出现在感染和损伤的部位。

嗜酸性粒细胞

嗜酸性粒细胞是具有吞噬作用的白细胞，当过敏反应和寄生虫感染时嗜酸性粒细胞会明显增多。嗜酸性粒细胞具有粗大的嗜酸性颗粒，可释放化学物质消灭病原体。嗜酸性粒细胞常存在于胃肠道的结缔组织中，细胞核呈双叶状，血液涂片上常呈U形分布。

乙肝是怎么引起的

一、发病原因

乙肝的致病原是乙肝病毒。乙肝病毒抵抗力极强，在60℃的条件下都难以将其杀灭，在100℃的高温下能存活7—8分钟左右。在各种类型的肝炎中，乙肝病毒潜伏期最长，在4—22周之间。

乙肝病毒在肝细胞内生存、复制后。再排出到血液中，所以不仅血流中病毒高负荷，而且肝脏的大多数肝细胞都被感染。乙肝病毒本身并不直接引起肝细胞的病变，只是在肝细胞内生存、复制，其所复制的抗原表达在肝细胞膜上，激发人体的免疫系统来辨认，并发生清除反应。

人体感染乙肝病毒后，由于机体免疫功能不同，从而病程发展也不同。如果机体的免疫功能健全，免疫系统被激活后识别乙肝病毒，攻击已感染病毒的肝细胞并清除之，这就导致了急性乙肝;如果机体的免疫功能被激活，但处于低下状态，机体对已感染病毒的肝细胞反复攻击，但是又不能完全清除之，导致肝组织慢性炎症反复发作，这就是慢性乙肝;如果机体的免疫功能处于耐受状态，不能识别乙肝病毒，因此不攻击已感染病毒的肝细胞，病毒与人"和平共处"，这就是乙肝病毒携带者。

乙型肝炎病毒(HBV)为直径42～47nm的球形颗粒(Dane颗粒)，由外壳与核心两部分组成。外壳有许多小球状颗粒，只含病毒表面抗原(HBsAg)。核心含环状双股脱氧核糖核酸(DNA)、DNA多聚酶、核心抗原(HBcAg)和e抗原(HBeAg)。双股DNA的正链短且不完整，长度仅为负链的50%，不含开放读码区，不能编码蛋白。负链完整，长度恒定，约含3200个核苷酸，有4个大开放读码区，可编码全部病毒蛋白：①S区基因。编码病毒外壳蛋白(HBsAg)，分为S、前S1、前S2基因区共同编码3种外壳蛋白肽段，即主蛋白由S基因编码，中蛋白由前S2和S基因编码，大蛋白由前S1、前S2和S基因编码。3种外壳蛋白的功能和性质有所不同;②C基因。编码核心抗原蛋白及其可溶成分e抗原，前C基因区可能在 HBV的装配和分泌中起作用;③P基因。其翻译产物为病毒的DNA多聚酶;④X基因。编码HBxAg，存在于HBsAg或HBcAg阳性病例肝细胞核内，可能是一种转录调节蛋白。

在HBV感染者的血清中存在3种不同形态的病毒颗粒，即小球形颗粒(直径22nm)、管状颗粒(直径22nm、长度100～1000nm)、Dane颗粒(直径42nm)。前二者分别为过剩的HBV外壳蛋白和不完整或空心的颗粒，无传染性，仅Dane颗粒在肝细胞中复制，具有传染性。黑猩猩及恒河猴为易感动物。HBV可在人肾和猴肾细胞、人羊膜细胞中生长，可从上述组织培养液中检出HBcAg，并引起细胞病变。

HBV抵抗力强，煮沸 30min121℃高压蒸汽15min160℃干热2h、环氧乙烷1.6g/L45min、0.5%二氯异氰尿酸钠30min、0.5%碘附10min、 2%碱性戊二醛、0.5%过氧乙酸7min可灭活。醇类、季铵盐类、氯己定不易灭活。紫外线照射30min可杀灭HBV。

HBsAg的亚型及其意义：HBsAg的组抗原决定簇“a”是共同的，亚型d和y，w和r互为等位基因，因而分为4个主要亚型：adw、adr、ayw和ayr。W亚型又可分为Wl、W2、W3和W4。HBsAg的亚型分布因地域、时间和民族而异。我国汉族以adr为主，adw次之;少数民族以ayw居多、ayr罕见。应用亚型单克隆抗体研究证明，d与y、w与r可以共同存在于同一抗原颗粒上，形成adwr、aywr、adyw或adyr等复合亚型。HBsAg各亚型间，虽然由于有组抗原决定簇“a”，存在一定的交叉免疫，但这种交叉免疫是不完全的。

二、发病机制

HBV在正常免疫功能的感染者引起急性病变;在异常免疫功能者则发生慢性肝炎和慢性肝病。HBV不是致细胞病变性(cytopathogenic)病毒，HBV感染后须经宿主的免疫应答引起病变，并使疾病进展。

1.发病机制

(1)免疫因素：

肝炎病毒感染时对病毒抗原的免疫应答与病毒消除和发病机制相关。HBV感染时，对外膜抗原的体液抗体应答利于清除血液中的病毒颗粒;对核壳和复制酶抗原的细胞免疫应答清除病毒，也损害肝细胞。

①病毒免疫清除和肝组织免疫损伤对在肝细胞表面的病毒抗原所引起宿主的细胞免疫应答，一般认为是肝细胞损伤的决定因素。细胞免疫应答表现单个核细胞在肝组织中的浸润，继以不同程度的组织破坏;组织破坏也与体液免疫相关，可由于反应抗体、抗体和补体、或免疫复合物的形成和在组织内的沉积。

肝炎病毒感染持续的原因是对病毒抗原的免疫应答低下，常由于病毒变异后的免疫逃逸;新生儿免疫耐受在HBV感染持续中起重要作用。

肝内T细胞：CHB(慢性乙型肝炎)病人的大量致敏淋巴细胞进入肝内，外周血仅能部分反映发生在肝内的免疫过程，有复制的比无复制的病人，肝内 CD4/CD8细胞比率显著较高，提示原位的辅助-诱导性CD4T细胞，可能经HBcAg激活，正调节CD8CTL的细胞毒活性。活动性病变中分离的Th 细胞克隆，近70%是Th1细胞;而PBMC中的仅4%。肝内隔室的CD4细胞群中的Th1密度越大，所产生IFNγ的水平越高，细胞毒活性也越强。肝内的炎症环境中的抗原刺激可能有利于这些细胞的扩增。Th1细胞参与CHB的肝细胞损伤机制。

抗原特异性识别：一种特异免疫反应的起始是 T细胞受体复合体对靶抗原的识别。T细胞受体复合物(淋巴细胞膜上的TCR与CD3结合物)还包括抗原提呈细胞或靶细胞表面的抗原和MHC决定簇。HBV 核壳抗原的核壳蛋白表位只是经细胞内处理的、8～16个氨基酸的一小段寡肽(表位肽)。CD4T细胞的识别部位大致在HBc/eAg肽的AAl-25和 AA61-85表位;CD8CTL识别的序列区未充分界定，不同种族、不同MHC型感染者的不同亚群的T细胞，在核壳抗原氨基酸序列上的识别表位有差别。 IgG-抗-HBc可部分掩蔽HBcAg表达，抗HBc抑制CTL对HBV靶抗原的识别，是使HBV感染持续的因素之一。抗HBc可抑制对肝细胞的细胞毒效应，由母亲被动输入的抗HBc亦可发生同样的作用。

HLA(白细胞抗原)限制：由APC(抗原提呈细胞)提呈的抗原寡肽/HLA-Ⅱ 复合体可直接与CD4T细胞CD4/HLA-Ⅱ分子的β2-结构区相结合，从而限定效应与靶细胞之间相互作用的特异性。活动性肝病的病人的肝细胞膜有较强的HLA-I表达，可更有效的向T细胞提供核壳寡肽。

同样，APC中抗原肽与HLA-Ⅱ结合形成复合体，提呈于细胞表面。Th细胞用其表面的CD4分子去探测APC表面的HLA-Ⅱ，用其TCR去探测沟中的互补抗原肽，这是CD4Th细胞的识别过程。

TCR与肽/HLA复合体之间的结合不稳定，须CD4分子与HLA-Ⅱ的β2区段结合、CD8分子与HLA-I的α3区段结合，形成立体结构才能保持。TCR与复合体之间必要的接触时间。此外，这些细胞都产生细胞黏附分子，细胞间的粘连加强了细胞间的反应。

以MHC(主要组织相容性复合体)表达的免疫遗传学基础是限定HBV感染发展的重要因素，可以解释对HBV易感的种族差异。HBV感染者中HLA定型与临床经过的相关性已有不少报告，但尚无一致的意见。与HBV感染病变慢性活动正相关的HLA定型有A3-B35、A29、A2、B8、B35、DR3、 DR7，负相关的有B5、B8、DQwl、DR2和DR5。

细胞因子：细胞因子在细胞间传递免疫信息，相互间形成一个免疫调节的细胞因子网络，通过这一网络进行细胞免疫应答。急性肝炎时在感染局部有IFN诱生，感染肝细胞释放IFN至周围介质，造成相邻肝细胞的抗病毒状态。慢性肝炎时由浸润的单个核细胞或其他非实质细胞原位释放的细胞因子，在免疫应答、细胞增殖和纤维化中起作用。

IL-2：Th产生IL-2和表达IL-2R，是调节细胞免疫和体液免疫的中心环节。在慢性肝炎和慢性肝病，IL-2产生减少，加入外源性IL-2亦不能纠正，提示IL-2R的表达亦降低，对已减少的IL-2也不能充分利用，因而不能充分激活T细胞增殖，在CHB和肝衰竭尤其显著。IL-2诱导产生淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)功能也降低。

干扰素：急性肝炎时感染肝细胞释放IFN至周围介质，造成相邻肝细胞的抗病毒状态。慢性HBV感染时产生IFN的能力降低，肝衰竭病人的最低，病人血清中存在诱生IFN的抑制因子。

肿瘤坏死因子α：主要由单核巨噬细胞产生，TNF-α;可能增强多种黏附分子的表达，引起炎症和细胞毒效应。TNF-α;可能毒害细胞自身、尤其可能激活细胞毒性免疫细胞。

转化生长因子α：因能使正常的成纤维细胞的表型发生转化而命名，活化的T、B细胞可产生较大量的TGFβ。一般而言，TGFβ对来自间质的细胞起刺激作用;而对上皮来源的细胞起抑制作用。

在CHB病人的PBMC(周围血单核细胞)中加入TGF-β1：对HBcAg刺激产生的IFN-γ和抗HBc有明显抑制作用;降低HBcAg刺激的 PBMC增殖。TGF-β对抗原特异或非特异、细胞或体液免疫，其抑制作用并无明显区别;对T细胞、B细胞和单核细胞都能抑制;也能抑制HLA-I限制的 CTL，对HBV感染肝细胞的细胞毒活性。

TGF-β;1激活肝脏贮脂细胞产生基质蛋白，诱导胶原和其他细胞外基质成分的合成。肝内细胞因子谱：Th1型细胞因子包括IL-2、IFN-γ和TNF-β，主要涉及细胞免疫;Th2型细胞因子如IL-4和IL-5，主要调节体液免疫应答。

CHB和CHC(慢性丙型肝炎)肝内浸润细胞中有不同的细胞因子类型，显示不同的抗病毒免疫应答行为。在CHC以Th1应答占优势，抑制HCV(丙型肝炎病毒)复制，但不足以完全清除，故HCV感染总是处于低负荷的病毒水平。在CHB较强的Th2和较弱的Th1应答，只能保持低效率的抗病毒效应，故感染倾向于长期持续。

如上所述，HBV感染的肝组织损害始于特异抗原-T细胞反应，继以非特异炎症细胞产生的细胞因子相互作用。炎症的一个重要介质是TNF，活动性CHB时IFN-γ刺激TNF-α产生增加，而在AsC时几乎无TNF-α产生。另外，CLD中IL-1产生增加与肝活检纤维化的量明显相关。干扰素治疗完全应答的病人，在治疗开始后的8～10周炎症激活，常同时PBMC产生TNF-α和IL-1增加;对治疗无应答的病人这些因子不增加。在此，T淋巴细胞通过淋巴因子IFN-γ、单核Mφ通过单核因子TNF-α和IL-1将两个系统连接起来。

②抗病毒免疫和病毒持续感染：参与免疫防护的主要是病毒的外膜抗原。外膜抗体应答：抗HBs易在病毒清除后的恢复期检出，而不在慢性感染中出现，故是中和性抗体;并可能防止病毒附着而侵入敏感细胞。然而，抗HBs通过形成抗原-抗体复合物，也参与一些与HBV感染有关的肝外综合征的发生机制。

免疫耐受性：免疫耐受是免疫系统在接触某种抗原后产生的、只对该种抗原呈特异的免疫无应答状态。对HBV的免疫耐受在感染小儿中发生较普遍。是形成AsC的免疫基础。

免疫耐受可能的机制：A.免疫细胞有大量不同特异性的细胞克隆，新生儿期与HBsAg相应的细胞克隆接触HBsAg上的决定簇，不是发生免疫应答，而是被清除或抑制;B.因CD8Ts功能增强缺乏抗HBs应答;C.母亲的HBeAg对新生儿HBV感染起免疫耐受作用;D.血清中高浓度的抗原使特异克隆的 B细胞耗竭，产生的少量抗体可被大量抗原耗费;或者抗病毒的CTL被高负荷的病毒所耗竭。

持续感染：A.病毒变异：由于变异而免疫逃逸;B.感染在免疫特赦部位保留：病毒感染的某些肝外组织淋巴细胞难以到达，或某些类型的细胞不表达HLA分子，病毒如能在这些部位复制，就可能逃避免疫清除，而成为肝脏持续感染的来源;C.免疫耐受：慢性HBV感染病人大都有不同程度的免疫耐受性。

(2)肝细胞凋亡病毒清除和组织损伤主要由CTL经穿孔素途径的细胞坏死或经CD95L的细胞凋亡;

也可由单核巨噬细胞经TNF-α途径的细胞凋亡或坏死。两者有独立的机制，不同的发生背景。凋亡是细胞死亡的主动形式，而坏死是被动形式，凋亡是在许多形态和生化方面不同于细胞坏死的特定的细胞死亡形式，但两者有一些共同的作用路段，分开两者的界线并不清楚。

CD95L和CD95或称FasL和Fas，是许多细胞的细胞表面分子，CD95L是配体，而CD95是其受体。CTL表达的CD95L结合靶细胞表达的CD95，可引起靶细胞的凋亡。

TNF-α和TNR-β：TNF-α主要由Mφ产生，是多向性或多效性的细胞因子，在炎症和感染性休克中起重要作用。

CD95L：CTL上的CD95L与靶细胞上的CD95结合，从而激活靶细胞内部的自杀程序。

经CD95的信号导致凋亡，激发这一途径须CD95与其抗体或与其配体交联。CD95激发的死亡途径不依赖细胞外Ca2，也不必有大分子的合成。

CTL的细胞毒效应是IL-2依赖的，因而，IL-2可抑制凋亡的发生。

凋亡细胞的胞膜完整，碎裂成凋亡小体被Mφ或相邻肝细胞吞噬，病毒和其他内容物不外泄，是一种自卫机制。DNA病毒拮抗细胞凋亡，转染HBV的肝癌细胞系HepG2215细胞，比未转染的HepG2细胞耐受凋亡因子的刺激。

病毒性肝炎的肝细胞、HB相关HCC的肝癌细胞也表达CD95L肝细胞的“自杀”和“同胞相杀”是一种非免疫攻击的清除病毒方式，可能是对HBV拮抗凋亡的补偿机制。

TNF-α：主要由Mφ产生，其介导的细胞毒活性取决于靶细胞的敏感性。当转译抑制剂放线菌酮致敏细胞后，TNF-α引起凋亡，有典型的凋亡特征。

病毒性肝炎时的肝细胞也产生TNF-α，HBx可转化激活TNF-α启动子;TNF-α杀伤取决于HBV表达的水平，在高表达的细胞系TNF-α才引起细胞凋亡。

A.急性和急性重型肝炎：病毒引起的肝细胞死亡的病理生理中，凋亡和坏死常同时发生。

阐明急性重型肝炎的发展过程有一小鼠模型可供参考。HBsAg转基因小鼠注射HBsAg特异的CTL，病变依次按阶段性发展：4h内CTL与肝细胞间直接相互作用，激发少数HBsAg阳性肝细胞发生凋亡，出现广泛散在的凋亡小体;4～12h中凋亡肝细胞继续增加，并出现许多炎症病灶，掺杂大量非抗原特异的淋巴细胞和中性粒细胞，扩大CTL的局部致细胞病变效应;注射后24～72h，多数肝细胞气球样变性，坏死广泛分布于整个小叶，同时有许多凋亡细胞。 CTL经抗原刺激分泌IFN-γ;，激活非特异的炎性细胞，包括肝内的Mφ，扩大CTL致细胞病变效应而发生大块肝细胞坏死。因而，急性重型肝炎是HBsAg特异、MHC-I限制的CTL在识别抗原、分泌IFN-γ;，激活Mφ后发生的。

TNF-α;可经坏死或凋亡(取决于实验系统)杀死不同的肿瘤细胞系，肝损害有2个时相，即以细胞凋亡为特征的初始期和凋亡和广泛的细胞坏死为特征的较后期。

B.慢性肝炎和慢性肝病：多数慢性肝炎病人肝内浸润的淋巴细胞可检出CD95L，可能表达CD95L的淋巴细胞对启动肝细胞凋亡是主要的效应细胞。 CD95L和CD95表达、DNA损伤和凋亡都以界面性炎症区最显著，符合病毒在肝内的传染过程;局部大量浸润的CTL表达CD95L，经CD95介导肝细胞凋亡，是病毒性肝炎区别于其他肝损害的特征。病毒性肝炎时肝细胞也同时表达CD95和CD95L，在凋亡发生过程中不仅是靶细胞，也是效应细胞。

肝细胞中CD95L和CD95表达的程度与炎症病变的活动性一致。正常肝组织阴性。轻型CH(慢性肝炎)可无或弱表达，仅在界面性炎症区有少数阳性细胞;中、重型CH常为中、强度表达，在界面性炎症区有多数阳性细胞，肝小叶中也有散在、甚至弥漫性分布。

CH合并早期LC和活动性LC常有较重炎症，CD95L和CD95也常是中、强度表达;而HCC表达较弱，凋亡降低正是肿瘤发生的机制。

肿瘤坏死因子的生物学活性

(1)杀伤或抑制肿瘤细胞：TNF在体内、体外均能杀死某些肿瘤细胞(cytolytic action)，或抑制增殖作用(cytostatic action)。肿瘤细胞株对TNF-α敏感性有很大的差异，TNF-α对极少数肿瘤细胞甚至有刺激作用。用放线菌素D、丝裂霉素C、放线菌酮等处理肿瘤细胞(如小鼠成纤维细胞株L929)可明显增强TNF-α杀伤肿瘤细胞活性。体内肿瘤对TNF-α的反应也有很大的差异，与其体外细胞株对TNF-α的敏感性并不平行。同一细胞系可能有敏感株和抵抗株如L929-S和L929-R。此外，靶细胞内源性TNF的表达可能会使细胞抵抗外源性TNF的细胞毒作用，因此，通过诱导或抑制内源性TNF的表达可改变细胞对外源性TNF的敏感性。巨噬细胞膜结合型TNF可能参与对靶细胞的杀伤作用。

(2)提高中性粒细胞的吞噬能力，增加过氧化物阴离子产生，增强ADCC功能，刺激细胞脱颗粒和分泌髓过氧化物酶。TNF预先与内皮细胞培养可使其增加MHCⅠ类抗原、ICAM-1的表达，IL-1、GM-CSF和IL-8的分泌，并促进中性粒细胞粘附到内皮细胞上，从而刺激机体局部炎症反应，TNF-α的这种诱导作用要比TNF-β为强。TNF刺激单核细胞和巨噬细胞分泌IL-1，并调节NHCⅡ类抗原的表达。

(3)抗感染：如抑制疟原虫生长，抑制病毒复制(如腺病毒Ⅱ型、疱疹病毒Ⅱ型)，抑制病毒蛋白合成、病毒颗粒的产生和感染性，并可杀伤病毒感染细胞。TNF抗病毒机理不十分清楚。

(4)TNF是一种内源性热原质，引起发热，并诱导肝细胞急性期蛋白的合成。TNF引起发热可能是通过直接刺激下丘脑体温调节中枢和刺激巨噬细胞释放IL-1而引起，还可通过IL-1、TNF-α刺激其它细胞产生IL-6。

(5)促进髓样白血病细胞向巨噬细胞分化，如促进髓样白血病细胞ML-1、单核细胞白血病细胞U937、早幼粒白血病细胞HL60的分化，机理不清楚。TGF-β可抑制TNF-α多种生物学活性，但不抑制TNF-α对髓样白血病细胞分化的诱导作用，甚至还有协同效应。

(6)促进细胞增殖和分化：TNF促进T细胞NHCⅠ类抗原表达，增强IL-2依赖的胸腺细胞、T细胞增殖能力，促进IL-2、CSF和IFN-γ等淋巴因子产生，增强有丝分裂原或外来抗原刺激B细胞的增殖和Ig分泌。TNF-α对某些肿瘤细胞具有生长因子样作用，并协同EGF、PDGF和胰岛素的促增殖作用，促进EGF受体表达。TNF也可促进c-myc和c-fos等与细胞增殖密切相关原癌基因的表达，引起细胞周期由Go期向G1期转变。最近报道INF-β(LT)是EB病毒转化淋巴母细胞的自分泌生长因子，抗LT抗体、sTNf R以及TNF-α能抑制EB病毒转化淋巴细胞的增殖。

免疫性不孕症的表现

夫妻双方保持正常的性生活情况下，任何一方的机体对生殖过程中任一环节产生自发性免疫，导致延迟受孕二年以上，称为免疫性不孕症。免疫性不孕症有广义与狭义之分。广义的免疫性不孕症是指机体对下丘脑-垂体-卵巢(睾丸)轴任一组织抗原产生免疫，女性可表现为无排卵、闭经，男性可表现为精子减少或精子活力降低。通常所指的免疫性不孕症是指狭义的，即不孕夫妇除存在抗精子免疫或抗透明带免疫外，其他方面均正常。

并非只有妻子对丈夫的精子产生抗体导致不孕，事实上丈夫体内产生对卵子的抗体而导致不孕的情况同样存在。生殖系统的自身抗原在两性均可激发免疫应答，导致自身免疫性不孕症，如男性抗精子免疫性不孕和女性抗透明带免疫不孕。精子抗原还可引起女性同种抗精子免疫反应，称为同种抗精子免疫不孕。已有大量的实验和临床资料证实抗精子抗体可致不孕，在不育患者中约占10%~30%。有关抗透明带抗体的研究则较少，一般认为它可致女性不育，但许多问题尚待证实。

目前免疫性不孕最为常见的表现形式主要有以下三种，分别是男性抗精子抗体导致的、女性抗精子抗体导致的以及抗精子抗体干预生育环节导致的。

1、男性抗精子抗体是如何产生的?

男性自身会出现抗精子抗体吗?这事听起来有些匪夷所思，事实上却非常普遍。精子虽为自身抗原，但它于青春期才出现，被自身免疫系统视为“异己”。然而血睾屏障阻碍了精子抗原与机体免疫系统的接触，不会产生抗精子的免疫反应。若血睾屏障发育不完善或遭到破坏，如手术、外伤、炎症等，导致精子外溢或巨噬细胞进入生殖道吞噬消化精子细胞，其精子抗原激活免疫系统，产生抗精子抗体。

在了解了手术、外伤和炎症都可能导致男性自身产生抗精子抗体之后，我们需要知道抑制性T淋巴细胞数量减少或活性下降同样会导致这种情况发生。此细胞存在于附睾和输精管的皮下组织中。正常情况下，由睾丸网及共输出管漏出的少量精子抗原可激活抑制性T细胞，使成熟B细胞识别抗原的过程变得迟钝，降低了机体对精子抗原的体液免疫反应，形成免疫耐受。当抑制性T细胞数量或活性下降以及精液内补充抑制性T细胞的因子缺乏时，可产生抗精子抗体。

2、女性抗精子抗体是如何产生的?

当女性生殖道出现感染、炎症请情况时，由于感染使局部的非特异性免疫反应加强，这可能导致精子直接被杀死。临床研究表明，男方精液中白细胞增加与女方生殖道局部和血清中抗精子抗体的发生明显相关，提示感染因子作为天然佐剂，免疫相关细胞与精子抗原共同介入女性生殖道，产生同种抗精子免疫。正常精液中含有前列腺素E和一种糖蛋白，具有免疫抑制作用，精液沉淀素具有抗补体活性。这些免疫抑制因素在正常情况下可抑制女方免疫活性细胞针对精子抗原的免疫应答，诱导免疫耐受。若丈夫精液中免疫抑制因子的缺乏可导致女方产生抗精子抗体。

另外，女性朋友们需要尽量避免在感染和炎症情况下同房，因为在生殖道粘膜破损的情况下性交，可使精子抗原通过破损的粘膜上皮屏障，进入上皮下的B淋巴细胞，产生抗精子抗体。异性间的肛交或口交是女性产生抗精子抗体的原因之一。另外，某些助孕技术如直接腹腔内人工授精，可导致大量精子进入腹腔，被腹腔中的巨噬细胞吞噬后，将精子抗原传递至盆腔淋巴结内的辅助性T淋巴细胞，从而诱发抗精子的免疫反应，使血清中出现暂时的抗精子抗体升高。

3、抗精子抗体是如何干预生育环节的呢?

(1)抗精子头部的抗体可干扰精子获能及头粒反应。

(2)细胞毒抗体在补体参与下使精子细胞膜损伤，精子死亡，抗精子尾干的抗体抑制精子活动。

(3)抗精子抗体的Fc段与宫颈粘液糖蛋白结合，干扰精子穿过排卵期宫颈粘液。

(4)抗精子抗体的调理作用增强生殖道局部吞噬细胞对精子的吞噬作用。

(5)抗精子头部的抗体能阻止精子与透明带及卵细胞膜结合，抑制受精。

人参抗癌

(一)抑制肿瘤细胞生长

1、调节肿瘤细胞信号通路系统

细胞信号通路系统是指细胞接受外界信号，通过一整套特定的机理，将细胞外的信号传导为细胞内信号，最终调节特定基因表达，并引起细胞的应答反应。

1)蛋白激酶c(PKC)和胰岛素样生长因子(IG-Fs)，胰岛素样生长因子I受体(IGF IR)信号通路。人参皂苷Rh2可能通过降低细胞内钙离子浓度来抑制PKC的转位和激活，并通过抑制细胞内PK Ca 蛋白的表达，最终阻碍PK Ca介导的增殖信号传导过程。

2)介导 半胱氨酸蛋白酶(Caspase)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)

2、影响细胞端粒酶的活性 端粒酶是一种RNA反转录酶，它能以自身RNA为模版，反转录合成端粒的重要序列。端粒酶是肿瘤的特异标志物。有一种说法：端粒酶活性高，肿瘤细胞活跃人参皂苷Rh2抑制端粒酶活性，使肿瘤细胞的端粒长度不能维持而进入衰老并最终死亡。

3、阻断肿瘤细胞重要成分的合成与代谢 人参皂苷Rh2主要通过阻断生物反应体系中一些重要酶类的合成与代谢来发挥抗肿瘤作用，按此途径治疗恶性肿瘤，治疗效果一般比较彻底，不易复发。

(二)诱导肿瘤细胞凋亡 细胞凋亡像花开花落一样，是一种主动的生理过程。正常情况下，细胞增殖与细胞凋亡之间始终保持着有增有减的动态平衡状态，这种动态平衡可维持细胞正常稳定的增殖。当某种因素引起细胞增殖失控和细胞凋亡受阻时，便可导致细胞异常增殖而发生癌症。研究发现，通过某些药物或以人工方式加速癌细胞凋亡可以治疗癌症。实验证实Rh2能够通过不同途径诱发脑胶质瘤，肝癌等多种癌细胞凋亡，恢复正常细胞增殖，有效的治疗癌症。

卵泡的生成排卵与运行

(一)卵泡的生长与成熟

1。始基卵泡由原始卵泡细胞、单层扁平上皮的颗粒细胞和基底膜构成。

2。初级细胞青春期至绝经期，每一月经周期的增殖早期，都有10-50个始基卵泡受到FSH的刺激，生长为初级卵泡。由初级卵母细胞、复层立方形颗粒细胞和一层基板组成。当卵母细胞增大2倍时，其周围有一层膜，称透明带。初级卵泡生长过程中有以下变化：①FSH受体出现于颗粒细胞;②E2和T受体出现于颗粒细胞浆和核上;③裂隙连接出现;④卵泡内膜出现。

3。次级卵泡颗粒细胞增多，并分泌卵泡液，形成卵泡腔。卵泡腔的扩大，把卵母细胞及其周围的一群颗粒细胞推向一侧，成为卵丘。卵泡液含许多物质，如FSH、LH、制卵泡素(Folliculostatin)、PGF2a、PGE2、粘多糖、白蛋白、球蛋白、雌激素、孕激素及性分泌素(gonadocrinin)等。

在次级卵泡早期，FSH刺激颗粒细胞，获得芳香化酶活性，有了芳香化酶和它的活性，颗粒细胞及膜细胞才能合成并分泌雌激素。次级卵泡发育过程中FSH刺激卵泡膜和颗粒细胞膜，产生LH受体，因而对LH的敏感性增加。

4。成熟卵泡每一月经周期中只有一个卵泡生成至成熟，叫做优势卵泡。其它卵泡受抑制因子(Inhibin)的抑制，停止生长，退化为闭锁卵泡。成熟的优势卵泡迅速长大，直径达20mm，并逐渐移行至卵巢表面，其贴近部分因无血管，呈半透明圆锥状，称排卵斑(Stigma)，突出于卵巢的表面，准备排卵。

(二)排卵与卵子的运行

FSH促进卵泡的生长成熟，也使颗粒细胞合成并分泌E2，高浓度E2对下丘脑及垂体的正反馈，使LH水平升高达到峰值，引起优势卵泡的排卵。卵泡液存在一些蛋白溶解酶，可溶解卵泡壁，致破裂排卵。在LH的作用下，成熟卵泡合成和分泌前列腺素PGF2a，PGF2a使成熟卵泡周围间质内的平滑肌纤维收缩，致卵泡破裂。

卵泡破裂后，卵细胞、透明带、放射冠及卵丘的颗粒细胞、卵泡液被排出来。

排卵时，由于输卵管系膜和卵巢韧带的收缩，使输卵管伞端覆盖在卵巢表面上;同时，伞端上皮细胞的纤毛朝输卵管腔口摆动，使卵子进入输卵管中，随即被移行至壶腥部。由于峡部肌层肥厚，排卵期雌激素占优势，致a肾上腺能受体的活性增强，使肌肉收缩。峡部管腔较狭窄，输卵管液流速以峡部较快，壶腹部较慢，因而卵子停留于壶腹部，等待受精。